Cisbio Bioassays offers an accurate enzymatic (RIA) assay for measuring the free and total anti-insulin autoantibodies. It is based on the sandwich type principle and carried out in human serum and plasma.
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Free and total anti-insulin antibody (AIAb) radioimmunoassay kit
Features
- Working range: negative & positive controls
- Sample: serum, plasma
Applications
- Predicting the future development of type 1 diabetes in asymptomatic children, adolescents, and young adults
- Differential diagnosis of type 1 versus type 2 diabetes
- Evaluating diabetics with insulin resistance in patients with established diabetes (type 1 or type 2)
- Investigation of hypoglycemia in non-diabetic subjects
- Detection of anti-insulin antibodies induced during a treatment by human or porcine insulin
작용원리
RIP
Immunoprecipitating reagent
anti-insulin antibody (AIAb) 측정의 원리는 Iodine 125가 표지된 인슐린과 특정하게 결합됨을 입증하는데 기초한다. 두가지의 대안적인 protocol이 있다.
1-Free anti-insulin antibodies (Free AIAb)
free AIAb는 순환성 인슐린과 결합되지 않지 않는 항체이다. 이것은 액체상태의 방사성 면역 침전 분석법에 기초한다: - 항인슐린 항체를 가진 50?L의 혈청은 Iodine 125가 표지된 인슐린과 배양한다. - AIAb 부분과 결합된 Iodine 125가 표지되어 있는 인슐린은 PEG에 의한 침전으로 free 125I 인슐린 부분과 분리된다. - 원심분리 후, 펠렛의 방사능량 측정을 통해 Iodine 125가 표지된 인슐린의 결합 비율의 계산한다.
*3 step 검사 절차: RT(실온)에서 2시간 + RT(실온)에서 10분 + 10분 원심분리.
2- Total anti-insulin antibodies (Total AIAb)
total AIAb는 Free AIAb와 혈청인슐린과 결합된 항체를 더한 것이다. 산성물질에 면역복합체의 분리, 활성탄에 의한 인슐린 흡착, 중화와 원심분리 후의 free AIAb와 동일한 프로토콜로 결정된다.
21- 활성탄에 의한 추출 ? 200?l 샘플 검사 절차: RT(실온)에서 10분 + 10분 원심분리.
22- 면역침전 100?l 상청액 검사 절차: RT(실온)에서 2시간 +RT(실온)에서 10분 + 10분 원심분리.